固體培養基在微生物檢測和分離中扮演著(zhù)重要角色。它為微生物提供了穩定的生長(cháng)環(huán)境,并有助于觀(guān)察微生物的菌落特征。 一、準備
1.根據實(shí)驗需求選擇合適的固體培養基,如LB瓊脂、MacConkey瓊脂等。
2.按照生產(chǎn)商的說(shuō)明,稱(chēng)取適量的干粉培養基,加入蒸餾水中,充分攪拌。
3.將混合液加熱至沸騰,保持1-2分鐘,以殺死其中的微生物。
4.將煮沸的培養基倒入無(wú)菌的培養皿中,使其均勻鋪滿(mǎn)底部。
5.放置室溫下冷卻至45-50℃,然后倒置放入冰箱中備用。
二、制備樣品
1.從待測樣品中取適量,加入到無(wú)菌生理鹽水中,充分混勻。
2.使用無(wú)菌移液器或無(wú)菌環(huán),從稀釋后的樣品中取適量的液體,涂抹在表面。
3.對于需要選擇性分離的微生物,可以在涂抹前在培養基中加入相應的抗生素或其他抑制劑。
三、培養微生物
1.將涂抹好的培養皿倒置放入恒溫培養箱中,設定適當的溫度和時(shí)間進(jìn)行培養。
2.培養過(guò)程中,避免震動(dòng)或移動(dòng)培養皿,以免影響微生物的生長(cháng)。
3.觀(guān)察培養皿中的菌落生長(cháng)情況,記錄菌落的數量、大小、形狀、顏色等特征。
四、分離純化微生物
1.根據菌落的特征,挑選出目標菌落。
2.使用無(wú)菌移液器或無(wú)菌環(huán),將目標菌落轉移到新的固體培養基上,進(jìn)行劃線(xiàn)分離。
3.重復劃線(xiàn)分離過(guò)程,直到獲得純化的微生物菌落。
五、注意事項
1.在整個(gè)操作過(guò)程中,確保無(wú)菌操作,避免污染。
2.選擇合適的培養基和培養條件,以提高微生物的檢出率和分離效果。
3.觀(guān)察菌落特征時(shí),要綜合考慮多個(gè)因素,如菌落的大小、形狀、顏色、透明度等。
4.分離純化微生物時(shí),要保持耐心和細心,避免操作失誤導致菌落丟失。